تریپسین کد T4799 سیگما

تریپسین کد T4799 سیگما
Trypsin from porcine pancreas T4799 Sigma

پودر لیوفیلیزه، BioReagent، مناسب برای کشت سلولی ، 1000-2000 واحد BAEE / میلی گرم جامد
شماره CAS 9002-07-7 کمیسیون آنزیم (EC) شماره 3.4.21.4 (BRENDA | IUBMB) EC شماره 232-650-8 شماره MDL MFCD00082094 NACRES NA.75

خصوصیات:
دسته بندی های مرتبط 3.4.x.x پپتیدازها، 3.x.x.x هیدرولازها، آنزیم های تحلیلی و صنعتی، شاخص کاربرد، بیوشیمیایی و معرف ها
منبع بیولوژیکی پانکراس خوک
خط تولید BioReagent
پودر لیوفیلیزه را تشکیل دهید
mol wt 23.8 kDa
غلظت 25 میلی گرم در میلی لیتر
کشت سلولی | پستانداران: مناسب
pH 7.6
حمل در محیط
دمای ذخیره سازی −20 درجه سانتی گراد

شرح
توضیحات کلی
تریپسین به دلیل عملکرد مؤثر و تحمل نسبت به نوع سلولی مختلف و خنثی سازی ناشی از سرم ، برای تفکیک بافت کاربرد دارد. [1]

کاربرد
برای هضم تریپسین پپتیدها از نسبت حدود 1: 100 به 1:20 برای تریپسین: پپتید استفاده کنید. کاربرد اصلی این محصول در از بین بردن سلولهای چسبنده از سطح کشت است. غلظت تریپسین لازم برای بیرون راندن سلول ها از زیر لایه آنها به درجه سلول و سن فرهنگ بستگی دارد. همچنین از تریپسین برای تعلیق مجدد سلول ها در طول کشت سلولی ، در تحقیقات پروتئومیکس برای هضم پروتئین ها و انواع مختلف هضم درون ژل استفاده شده است. برنامه های اضافی شامل ارزیابی تبلور توسط تکنیک های مبتنی بر غشاء و در یک مطالعه برای تعیین اینکه میزان و عملکرد تاشو پروتئین می تواند با حضور تله های جنبشی محدود شود.

تریپسین از لوزالمعده خوک برای هضم استخوان های مرغ استفاده شده است. [2] همچنین در جداسازی سلولهای اندوتلیال لوتئال نیز مورد استفاده قرار گرفته است. [3] [4] [5]

بسته بندی
5 ، 10 ، 25 ، 100 ، 500 گرم در بطری پلی

اقدامات بیوشیمی / فیزیولول
تریپسین پپتیدها را در سمت C ترمینال مانده های لیزین و آرژنین قطع می کند. اگر هیدرولیز اسید در دو طرف محل برش قرار داشته باشد سرعت هیدرولیز این واکنش کند می شود و اگر یک باقی مانده پرولین در سمت کربوکسیل محل برش قرار داشته باشد ، هیدرولیز متوقف می شود. pH بهینه برای فعالیت تریپسین 7-9 است. تریپسین همچنین می تواند در قطع ارتباط استر و آمید مشتقات مصنوعی اسیدهای آمینه عمل کند. EDTA به محلول های تریپسین به عنوان یک عامل کلات کننده اضافه شده است که یون های کلسیم و منیزیم را که باعث ایجاد مبهم از پیوندهای پپتیدی که بر روی آن عمل می کند ، خنثی می کند. از بین بردن این یون ها فعالیت آنزیمی را افزایش می دهد.

مهارکننده های پروتئین سرین ، از جمله DFP ، TLCK ، APMSF ، AEBSEF و آپروتینین ، از جمله دیگر ، تریپسین را مهار می کنند.

اجزاء
تریپسین متشکل از یک پلی پپتید واحد زنجیره ای از 223 اسید آمینه است ، که با حذف هگزاپپتید N- ترمینال از تریپسینوژن تولید می شود که در پیوند Lys - lle peptide ایجاد می شود. توالی اسیدهای آمینه توسط 6 پل دی سولفید متصل است. این شکل بومی تریپسین ، بتا تریپسین است. BETA- تریپسین را می توان تجزیه کرد ، و در باقی مانده Lys - Ser تکه تکه می شود تا آلفا تریپسین تولید شود. تریپسین یکی از اعضای خانواده پروتئیناز سرین است.

احتیاط
محلول ها در هیدروکلراید 1 میلی متر به مدت 1 سال در محل های فساد پایدار بوده و در دمای 20 درجه سانتیگراد ذخیره می شوند. وجود Ca2 نیز باعث کاهش خود به خودی تریپسین شده و پایداری آن در محلول را حفظ می کند. تریپسین همچنین بیشتر فعالیت خود را در 2.0 M اوره ، 2.0M گوانیدین هیدروکلراید یا 0.1٪ (وزنی در ولت) SDS حفظ می کند.

تعریف واحد
یک واحد BAEE با استفاده از BAEE به عنوان بستر ، یک ΔA253 از 0.001 در دقیقه با pH 7.6 در 25 درجه سانتیگراد تولید می کند. یک واحد BTEE = 320 واحد ATEE. میزان واکنش = 3.2 میلی لیتر (مسیر نور 1 سانتی متر).

یادداشت آماده سازی
این محصول یک پودر لیوفیلیزه محلول در محلول نمک متعادل Hank′s با 25 میلی گرم در میلی لیتر است.
برای برنامه های کاربردی که به EDTA احتیاج دارند ، حل کردن تریپسین باید با یک محلول نمک حاوی نمک حاوی Ca2 + یا Mg2 + انجام شود.

Properties

Description