محلول فایکول 100 سی سی

فایکول Lymphodex Inno-train

فایکول یک محلول استاندارد آزمایشگاهی بی رنگ و استریل است، برای جداسازی لنفوسیت های T , B در مطالعات آزمایشگاهی از این محلول استفاده می شود، برای جداسازی لنفوسیت ها از خون محیطی مغز استخوان و خون مناسب است، جداسازی رده سلول های لنفوسیت از محتویات باقی مانده لکوسیتی با استفاده از گرادیان غلظتی ماده فایکول و سانتریفیوژ انجام می شود، اهمیت این ماده در حفظ بقا لنفوسیت ها و سطح پایین اندوتوکسین آن است، فایکول Lymphodex Innotrain یکی از با کیفیت ترین فایکولهای موجود می باشد که بسیاری از مراکز تحقیقاتی از این برند استفاده می کنند واین شرکت ارائه دهنده فایکول هایinnotrain آلمان با

بهترین قیمت در سطح کشور می باشد.

روش جداسازی سلولهای تک هسته ای خون محیطی با فایکول اینوترین

فایکول اینوترین آلمان یکی از بهترین محلول های موجود در بازاربوده که با کیفیت بسیار بالا استخراج سلولی را میتوان انجام داد.

جهت استفاده از محصول دقیقا طبق پروتوکل زیر مراحل کار را انجام دهید.

رقیق سازی خون :

1- ابتدا حجم 5 میلی لیتر خون EDTA شده از هر نمونه را در فالکون 15میلی لیتری را با نسبت یک به یک (50%-50%) با 5 میلی لیتر PBS یا بافر مورد استفاده برای دریافت غلظت مناسب رقیق می کنیم . < در صورتی خون به صورت فرش باشد و و مقدار غلظت (RBC( خون بالا نباشد میتوانید از خون غلیظ مستقیم استفاده کنید. <در صورتی که در این قسمت از استخراج سوال دارید به مجموعه سوالات انتهای برشور مراجعه کنید.



مقدار فایکول: 2- مقدار 5 میلی لیتر محلول فایکول را در لوله فالکون مشابه دیگری ریخته و سپس بوسیله پیپت پاستور خون رقیق شده در مرحله

قبل را به آهستگی و به شکلی که با محلول فایکول مخلوط نشود از کنار دیواره و به آرامی روی سطح فایکول می ریزیم. > نباید خون رقیق شده با محلول فایکول ترکیب شود و می بایست خون روی سطح فایکول قرار گیرد. <در صورتی که در این قسمت از استخراج سوال دارید به مجموعه سوالات انتهای برشور مراجعه کنید.



مرحله سانترفیوژ: 3-سپسفالکونرادرسانتریفیوژیخچالدارقراردادهبادمای20تا18درجهسانتیگرادودورrpm 4000(،g400)

برای 9 الی 10 دقیقه سانتریفیوژ می کنیم تا لایه های مختلف براساس شیب چگالی جدا شوند. اگر از سانترفیوژ یخچال دار استفاده میکنید برای بهتر استخراج شدن سلول با کیفیت 9:Break :0 ،Acceleration را تنظیم کنید. > در صورتی که در این قسمت از استخراج سوال دارید به مجموعه سوالات انتهای برشور مراجعه کنید.

برداشت سلول:

4- پس از انجام سانتریفیوژ فالکون حاوی لایه های متمایز به ترتیب از بالا به پایین شامل : پلاسما (زردرنگ) Buffy Coatحلقه شیری رنگ کدر)، فایکول ( شفاف) و گلبولهای قرمز (قرمز تیره )می باشد. بوسیله پیپت پلاستیکی یا سمپلر و با دقت کامل، حلقه شیری رنگ و کدر بین سرم و فایکول را جدا کرده و به لوله ای دیگر منتقل می کنیم. > حلقه شیری رنگ کدر Buffy Coat حاوی سول های PBMC می باشد.