تریپسین کد T4799 سیگما

تریپسینکد T4799 سیگما Trypsin from porcine pancreas T4799 Sigma پودر لیوفیلیزه، BioReagent، مناسب برای کشت سلولی ، 1000-2000 واحد BAEE / میلی گرم جامد شماره CAS 9002-07-7 کمیسیون آنزیم (EC) شماره 3.4.21.4 (BRENDA | IUBMB) EC شماره 232-650-8 شماره MDL MFCD00082094 NACRES NA.75 خصوصیات: دسته بندی های مرتبط 3.4.x.x پپتیدازها، 3.x.x.x هیدرولازها، آنزیم های تحلیلی و صنعتی، شاخص کاربرد، بیوشیمیایی و معرف ها منبع بیولوژیکی پانکراس خوک خط تولید BioReagent پودر لیوفیلیزه را تشکیل دهید mol wt 23.8 kDa غلظت 25 میلی گرم در میلی لیتر کشت سلولی | پستانداران: مناسب pH 7.6 حمل در محیط دمای ذخیره سازی 20 درجه سانتی گراد شرح توضیحات کلی تریپسین به دلیل عملکرد مؤثر و تحمل نسبت به نوع سلولی مختلف و خنثی سازی ناشی از سرم ، برای تفکیک بافت کاربرد دارد. [1] کاربرد برای هضم تریپسین پپتیدها از نسبت حدود 1: 100 به 1:20 برای تریپسین: پپتید استفاده کنید. کاربرد اصلی این محصول در از بین بردن سلولهای چسبنده از سطح کشت است. غلظت تریپسین لازم برای بیرون راندن سلول ها از زیر لایه آنها به درجه سلول و سن فرهنگ بستگی دارد. همچنین از تریپسین برای تعلیق مجدد سلول ها در طول کشت سلولی ، در تحقیقات پروتئومیکس برای هضم پروتئین ها و انواع مختلف هضم درون ژل استفاده شده است. برنامه های اضافی شامل ارزیابی تبلور توسط تکنیک های مبتنی بر غشاء و در یک مطالعه برای تعیین اینکه میزان و عملکرد تاشو پروتئین می تواند با حضور تله های جنبشی محدود شود. تریپسین از لوزالمعده خوک برای هضم استخوان های مرغ استفاده شده است. [2] همچنین در جداسازی سلولهای اندوتلیال لوتئال نیز مورد استفاده قرار گرفته است. [3] [4] [5] بسته بندی 5 ، 10 ، 25 ، 100 ، 500 گرم در بطری پلی اقدامات بیوشیمی / فیزیولول تریپسین پپتیدها را در سمت C ترمینال مانده های لیزین و آرژنین قطع می کند. اگر هیدرولیز اسید در دو طرف محل برش قرار داشته باشد سرعت هیدرولیز این واکنش کند می شود و اگر یک باقی مانده پرولین در سمت کربوکسیل محل برش قرار داشته باشد ، هیدرولیز متوقف می شود. pH بهینه برای فعالیت تریپسین 7-9 است. تریپسین همچنین می تواند در قطع ارتباط استر و آمید مشتقات مصنوعی اسیدهای آمینه عمل کند. EDTA به محلول های تریپسین به عنوان یک عامل کلات کننده اضافه شده است که یون های کلسیم و منیزیم را که باعث ایجاد مبهم از پیوندهای پپتیدی که بر روی آن عمل می کند ، خنثی می کند. از بین بردن این یون ها فعالیت آنزیمی را افزایش می دهد. مهارکننده های پروتئین سرین ، از جمله DFP ، TLCK ، APMSF ، AEBSEF و آپروتینین ، از جمله دیگر ، تریپسین را مهار می کنند. اجزاء تریپسین متشکل از یک پلی پپتید واحد زنجیره ای از 223 اسید آمینه است ، که با حذف هگزاپپتید N- ترمینال از تریپسینوژن تولید می شود که در پیوند Lys - lle peptide ایجاد می شود. توالی اسیدهای آمینه توسط 6 پل دی سولفید متصل است. این شکل بومی تریپسین ، بتا تریپسین است. BETA- تریپسین را می توان تجزیه کرد ، و در باقی مانده Lys - Ser تکه تکه می شود تا آلفا تریپسین تولید شود. تریپسین یکی از اعضای خانواده پروتئیناز سرین است. احتیاط محلول ها در هیدروکلراید 1 میلی متر به مدت 1 سال در محل های فساد پایدار بوده و در دمای 20 درجه سانتیگراد ذخیره می شوند. وجود Ca2 نیز باعث کاهش خود به خودی تریپسین شده و پایداری آن در محلول را حفظ می کند. تریپسین همچنین بیشتر فعالیت خود را در 2.0 M اوره ، 2.0M گوانیدین هیدروکلراید یا 0.1٪ (وزنی در ولت) SDS حفظ می کند. تعریف واحد یک واحد BAEE با استفاده از BAEE به عنوان بستر ، یک A253 از 0.001 در دقیقه با pH 7.6 در 25 درجه سانتیگراد تولید می کند. یک واحد BTEE = 320 واحد ATEE. میزان واکنش = 3.2 میلی لیتر (مسیر نور 1 سانتی متر). یادداشت آماده سازی این محصول یک پودر لیوفیلیزه محلول در محلول نمک متعادل Hanks با 25 میلی گرم در میلی لیتر است. برای برنامه های کاربردی که به EDTA احتیاج دارند ، حل کردن تریپسین باید با یک محلول نمک حاوی نمک حاوی Ca2 + یا Mg2 + انجام شود. Properties Related Categories 3.4.x.x Peptidases,3.x.x.x Hydrolases,Analytical and Industrial Enzymes,Application Index,Biochemicals and Reagents, biological source Porcine pancreas product line BioReagent form lyophilized powder mol wt 23.8kDa concentration 25mg/mL application(s) cell culture | mammalian: suitable pH 7.6 shipped in ambient storage temp. 20C Description General description Trypsin is applicable for tissue disaggregation, due to its effective action and tolerance towards different cell type and serum-induced neutralization.[1] Application For trypsin digestion of peptides, use a ratio of about 1:100 to 1:20 for trypsin:peptide. The typical use for this product is in removing adherent cells from a culture surface. The concentration of trypsin necessary to dislodge cells from their substrate is dependent primarily on the cell type and the age of the culture. Trypsins have also been used for the re-suspension of cells during cell culture, in proteomics research for digestion of proteins and in various in-gel digestionsns. Additional applications include assessing crystallization by membrane-based techniques and in a study to determine that protein folding rates and yields can be limited by the presence of kinetic traps. Trypsin from porcine pancreas has been used to digest chicken bones.[2]It has also been used in the isolation of luteal endothelial cells.[3][4][5] Packaging 5, 10, 25, 100, 500 g in poly bottle Biochem/physiol Actions Trypsin cleaves peptides on the C-terminal side of lysine and arginine residues. The rate of hydrolysis of this reaction is slowed if an acidic residue is on either side of the cleavage site and hydrolysis is stopped if a proline residue is on the carboxyl side of the cleavage site. The optimal pH for trypsin activity is 7-9. Trypsin can also act to cleave ester and amide linkages of synthetic derivatives of amino acids. EDTA is added to trypsin solutions as a chelating agent that neutralizes calcium and magnesium ions that obscure the peptide bonds on which trypsin acts. Removing these ions increases the enzymatic activity. Serine protease inhibitors, including DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF, and aprotinin, amongst others, will inhibit Trypsin. Components Trypsin consists of a single chain polypeptide of 223 amino acid residues, produced by the removal of the N-terminal hexapeptide from trypsinogen which is cleaved at the Lys - lle peptide bond. The sequence of amino acids is cross-linked by 6 disulfide bridges. This is the native form of trypsin, beta-trypsin. BETA-trypsin can be autolyzed, cleaving at the Lys - Ser residue, to produce alpha-trypsin. Trypsin is a member of the serine protease family. Caution Solutions in 1 mM HCl are stable for 1 year in aliquots and stored at -20C. The presence of Ca2+will also diminish the self-autolysis of trypsin and maintain its stability in solution. Trypsin will also retain most of its activity in 2.0 M urea, 2.0 M guanidine HCl, or 0.1% (w/v) SDS. Unit Definition One BAEE unit will produce a A253of 0.001 per min at pH 7.6 at 25 C using BAEE as substrate. One BTEE unit = 320 ATEE units. Reaction volume = 3.2 mL (1 cm light path). Preparation Note This product is a lyophilized powder soluble in Hanks Balanced Salt Solution at 25 mg/mL. For applications that require EDTA, solubilizing trypsin should be done with a buffered salt solution contaiing no Ca2+or Mg2+.